ساختار و عمل در دو آنزیم آلفا آمیلاز ازb.licheniformis و b.amyloiquefaciens
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تهران
- نویسنده خسرو خواجه
- استاد راهنما محسن گرگانی
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1379
چکیده
در این مطالعه ابتدا پایداری حرارتی آلفا آمیلازهای مزوفیل (حاصل از baa, bacillus amyloliquefaciens) و ترموفیل (حاصل از bla, bacillas licheniformis) و اثرات عوامل دناتوره کننده، حلال های آلی و پایدارکننده ها بررسی شد. آنزیم ترموفیل در حلال آبی مقاومت بیشتری در مقابل عوامل دناتوره کننده داشت ولی چنین تفاوتی در شرایط غیرآبی مشاهده نشد. به علاوه پایداری این دو آنزیم در حضور یکسری از پایدارکننده ها افزایش یافت. از میان پایدارکننده های مختلف سوربیتول بیشترین مقاومت ساختاری در این دو آنزیم ایجاد نمود، به طوری که همزمان افزایش tm و کاهش دآمینه شدن این پروتئین ها در اثر حرارت مشاهده شد. مطالعه مقایسه ای پروتئولیز محدود و وسیع bla, baa با استفاده از تریپسین انجام گرفت. طبق انتظار، آنزیم مزوفیل مقاومت بیشتری در مقابل هضم توسط تریپسین از خود نشان داد. در طی فرآیند پروتئولیز فعالیت baa کاهش یافت ولی بالعکس فعالیت bla افزایش پیدا کرده و به طور همزمان کاهش در پایداری حارتی آن مشاهده شد. با اندازه گیری های cd، مشخص شد که tm آنزیم در اثر تیمار با تریپسین از 89 درجه سانتیگراد به 86 درجه سانتیگراد می رسد که نشاندهنده افزایش انعطاف پذیری در طی این فرآیند است. در حضور پایدارکننده ها هضم پروتئولیتیکی هر دو آنزیم کاهش یافت. این پدیده احتمالا ناشی از پایدارشدن (سخت تر شدن) این آنزیم ها در حضور پایدارکننده ها است. افزایش پایداری می تواند ناشی از هیدراسیون ترجیحی پروتئین ها در حضور این افزودنی ها باشد. الگوی هضم با توجه به اطلاعات بیوشیمایی در رابطه با ساختار این پروتئین ها و حرکات موضعی در نواحی لوپ مورد بحث قرار گرفت. دستکاری شیمیایی رزیدوی لیزین در دو آلفا آمیلاز باکتریائی، bla, baa ، با استفاده از سیتراکونیک انیدرید مورد بررسی قرار گرفت. این تغییر باعث افزایش فعالیت و پایداری در این دو آنزیم گردید به طوری که پایداری baa در 80 درجه سانتیگراد افزایش یافت و فعالیت bla در 15 درجه سانتیگراد، پانزده برابر شد و kcat/ km آن سه برابر گردید. غیرفعال شدن برگشت ناپذیر و اندازه گیری های cd این متالوآنزیم ها در حالات طبیعی و دستکاری شده در حضور و عدم حضور کلسیم (10mm) مورد بررسی قرار گرفت. مطالعات cd نشان داد که با دستکاری شیمیایی ساختار سوم این پروتئین ها تغیر یافته که در حضور کلسیم تعدیل می شود. سوربیتول در حضور و عدم حضور کلسیم، پایداری فرم های مختلف این دو آنزیم را به طور موثری افزایش داد. نتایج از لحاظ اهمیت کاربردی این دیدگاه در جهت افزایش همزمان پایداری و فعالیت آنزیمی مورد بحث قرار گرفت.
منابع مشابه
ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی و مهار آنزیم آلفا آمیلاز دو گونه Sargassum angostifolium و Palisada perforata
بیماری دیابت نوع دو، ناشی از اختلال در عملکرد و ترشح انسولین و به دنبال آن افزایش میزان قند خون است که به سومین عامل مرگ و میر در جهان تبدیل شده‌است. مشتقات فعال اکسیژن از جمله عوامل آسیب و مرگ برنامه‌ریزی شده سلولی و دیابت می-باشند. اثرات جانبی مخرب مصرف داروهای سنتزی بر بیماران، تحقیقات را به سمت داروهای طبیعی متمایل کرده‌است. در این تحقیق، فعالیت آنتی‌دیابتی و آنتی‌اکسیدانی سه عصاره متانولی،...
متن کاملمطالعه تاثیر فعال کننده ترکیبات پورینی بر آنزیم آلفا آمیلاز: احتمال وجود جایگاه تنظیم فعالیت در ساختار آنزیم
No Abstract #####
متن کاملبررسی اثر آنزیم آلفا آمیلاز بر کیفیت ماکارونی
Macaroni is a food product generally considered as one of the paste products. These products are produced from semolina that is, in turn, produced through special processing of milled durum wheat. In order to examine the effect of α-amylase on macaroni quality, three cultivars, namely Yavarous, Zardak and Altar 84, were chosen from each of which some wheat sprouts were prepared and mixed with...
متن کاملبررسی اثر آنزیم آلفا آمیلاز بر کیفیت ماکارونی
Macaroni is a food product generally considered as one of the paste products. These products are produced from semolina that is, in turn, produced through special processing of milled durum wheat. In order to examine the effect of α-amylase on macaroni quality, three cultivars, namely Yavarous, Zardak and Altar 84, were chosen from each of which some wheat sprouts were prepared and mixed with u...
متن کاملDegenerate Four Wave Mixing in Photonic Crystal Fibers
In this study, Four Wave Mixing (FWM) characteristics in photonic crystal fibers are investigated. The effect of channel spacing, phase mismatching, and fiber length on FWM efficiency have been studied. The variation of idler frequency which obtained by this technique with pumping and signal wavelengths has been discussed. The effect of fiber dispersion has been taken into account; we obtain th...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تهران
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023